在293T细胞中做了如下处理：CTL（无转染试剂），flag阳性质粒，flag-目的基因质粒（已测序）。6-well板，每孔转染2ug质粒，6ul PEI。转染48h后收细胞蛋白做WB。WB结果：an

请教，293T细胞转染了含HA标签的融合质粒，WB出现的非特异条带（稍小于75KD）是什么蛋白？ 还会在哪些位置出现非特异性条带？ 我一抗使用两株抗体正常WB均有非特异性显色，我直接使用二抗孵育没孵一抗均没有显色，但我感觉不是一抗抗体的问题。 同问，空细胞也有，但是如果是内源的为什么HA标签可以识别？ 0008000：HA 空细胞也有这个问题，是什么原因啊？ dxy_pyl7xft7：问题解决了吗？ 大哥，同是空细胞和空载都有杂带不知如何解决。 请问这个问 …

通过将编码ha-nlrp3和flag-atf5的质粒转染293t细胞，wb结果表明atg5促进了nlrp3的降解（图9g）。 以上结果表明， USP22能与ATG5相互作用，提示USP22可能通过ATG5依赖的自噬途径降解NLRP3从而抑制NLRP3炎症小体的激活 。

6孔板细胞数量不是很大，做2次wb就差不多了，还是定量再变性比较好。 另外细胞数量不多可以收集细胞至离心管中，PBS清洗2次加二三十微升裂解液冰上震荡裂解15-30min，离心→浓度检测→定量→变性→WB，少加点裂解液蛋白浓度足够，加200的话估计浓度不到1ug/ul ...

之前将三段基因用质粒做载体导入293t细胞做wb都能检测到表达，但是转染肝癌细胞转染效率极低，所以换用慢病毒，按说慢病 小木虫 登陆 | 注册

研一在读，求大神解答小弟困惑，包病毒再收293T不是更好吗？ 能收到目的基因敲低的293T样品，同时还能收病毒液。 为什么要瞬转去检验呢？ 难道包病毒的29… 研一在读，求大神解答小弟困惑，包病毒再收293T不是更好吗？ 能收到目的基因敲低的293T样品，同时还能收病…

使用293T细胞做western blot，一般使用什么做内参？ actin,还是？ 返回小木虫查看更多. PCR实验技术全... An Intro... 2016年新著—... DNA凝胶电泳弥... 一般选择β-actin比较多。 使用293T细胞做westernblot，一般使用什么做内参？ actin,还是？

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293T细胞能够复制携带SV40复制区的载体，当用于生产 逆转录病毒 时，会产生高滴度病毒。 293T细胞已广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白质生产。 细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象，此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养，若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种； 建议使用经过包被或者高 …

2023年10月12日 · 将LRP6的三种质粒分别与CTSD野生型质粒共转至293T细胞，另外LRP6 WT与CTSD（G316R）质粒共转，WB均使用标签抗体显示相应的目的蛋白。 从Input组结果可以看出，每组均显示了条带，表明蛋白样本表达正常。 接着，IP组中的各组分别用含Flag抗体的磁珠和含His抗体的磁珠去拉沉淀复合物，WB再检测Flag和His。 IP: Flag结果显示，前两组中His均能检测到明显的条带，表明LRP6和CTSD之间存在相互作用，LRP6的P1427Q突变并不影响二者的 …