加入20ul 5XKCM，加入DNA和dd H20至总体积为100ul，保持冰上. 3. 加入100ul感受态细胞，混合并在冰上保持20分钟. 5. 向试管中加入1ml预热的LB，在37℃温育40-60分钟. 6. 离心，剩 …

doi:10.1101/pdb.rec11454 Cold Spring Harb Protoc 2008. 2008: pdb.rec11454- » Full Text

2015年1月14日 · 内容提示： 转化大肠杆菌（KCM 法） （1） 试剂 TSS 配方： 10% PEG8000； 5% DMSO； 20 mmol/L MgSO4或 MgCl2； 以上各成分溶于 LB 培养液中定容至 100 mL， 过 …

1 . To make 5X KCM, mix the following: Table 4. 5X KCM mix Components Example Amount Concentra tion KC l CaC l 2 MgC l 2 dH 2 O 37. 25 g 1 6.65 g 50. 5 g (MgC l 2 dH 2 O ) Fill up …

2010年10月2日 · 感受态细胞 （competent cell）是大肠杆菌（Escherichia coli）经过特殊（例如电击、CaCl2、RbCl (KCl等）处理后， 细胞膜通 透性发生改变进而能够允许外源DNA得以进 …

转化大肠杆菌（KCM法） （1）试剂 TSS配方：10% PEG8000；5% DMSO；20mmol/L MgSO4或MgCl2；以上各成分溶于LB培养液中定容至100mL，过滤除菌。 5×KCM溶液配 …

Add 6ul of 5X KCM buffer to the cells. Add at least 10ng of plasmid DNA to the cell-‐buffer mixture. Incubate on ice for 20 minutes. Heat shock for 45 seconds. Incubate on ice for 2 …

20 µL 5x KCM + x µL DNA (~10 ng or 5uL of Gibson reaction product) + ddH 2 O to 100 µL; Add 100 µL competent cells, mix gently and incubate on ice for 20 minutes; DH5α for Gibson …

KCM感受态细胞转化方法 1.建立体系，在10 μl连接产物中加入20 μl KCM (5×)溶液和70 μl ddH2O；总体积为100 μl。如果转化质粒，可以直接取2 μl质粒加入感受态细胞，略过此步 …

2023年6月19日 · Mix 5 μL of 5x KCM solution with DNA (around 1-5 μL) and H2O to a total of a 25 μL mixture.