疏水相互作用色谱 (HIC) 是一种蛋白质分离、纯化和表征的传统技术。 随着抗体偶联药物 (ADC) 的不断发展，HIC 在ADC 表征和分析上应用越来越广泛。 与其他技术不同，HIC 允许蛋白质在保持天然结构和活性的温和非变性条件下进行分析。 这一点非常重要，为HIC后续的研究提供了条件。 接下来，我们以一个传统的高效液相仪配合使用硫酸铵缓冲液为例，为大家阐述HIC的关键参数。 并对方法优化注意事项进行了总结。 简介. HIC的方法最早由 Tiselius 提出，他称此技术为" …

疏水相互作用色谱 (hic) 是一种分离相互间疏水性逐渐增加的生物分子的 方法。 这种技术非常适合用于 ADC 的分析，因为这些复杂分子的疏水性通常高于未

Herein, we describe a generic HIC protocol for the screening, analysis, and characterization of ADCs using an ammonium sulfate buffer and a high-pressure liquid chromatography system. Parameters affecting data quality and interpretation are addressed. In addition, several recommendations are included for method optimization and troubleshooting.

In this chapter, the rationale and general considerations for developing a preparative hydrophobic interaction chromatography (HIC) method are described for isolation of an example ADC with specific drug load, e.g., two monomethyl auristatin E (MMAE) payloads (E2).

Hydrophobic interaction chromatography (HIC) is a method of performing separations of biomolecules with increasing hydrophobicity. This makes it a technique that is well suited to the analysis of ADCs, as these complex molecules are often …

在本文中，我们将介绍不同色谱的耦合技术，包括 疏水相互作用色谱 (HIC)、 反相液相色谱 (RPLC)、 尺寸排阻色谱 (SEC)、 离子交换色谱 (IEX) 和亲水液相色谱 (HILIC)。 HIC-SEC、SEC-SEC、HIC-RPLC、IEX-RPLC、RPLC-RPLC 和 HILIC-RPLC，均与高分辨率质谱联用 (HRMS)，在 ADC 的表征背景下进行讨论。 前言. 抗体偶联药物 (ADC)是一类最有前途的人类癌症治疗药物。 强效的细胞毒性药物，通过稳定的连接子与mAb共价结合。 该治疗性生物分子旨 …

2023年11月26日 · HIC是可在完整分子水平上监控DAR的最佳方法，可直接定量不载药抗体（DAR0）组分，一般认为D0为非有效组分且会占据ADC结合位点影响ADC内吞。 反相色谱（RP）利用目标分子之间的极性差异进行分离，分离度较好，且方法本身质谱兼容，可直接进行不同载药形式的分子量定性。 反相方法也可直观看到小分子药物在不同位点的分布情况。 如下图所示，对于常规链间二硫键巯基偶联的ADC分子，由于高载药异质性，需对样品进行还原后再进 …

2024年10月7日 · 疏水相互作用色谱(hic)在抗体偶联药物(adc)分析中的应用 hic作为一种传统技术，主要用于蛋白质的分离、纯化和表征。在adc的不断发展下，hic在表征和分析上日益广泛。

2024年6月20日 · 疏水相互作用色谱 (Hydrophobic Interaction Chromatography，简称HIC) 是一种蛋白质分离、纯化和表征的传统技术。 近些年来，随着单克隆抗体、双抗、三抗以及抗体偶联药物 (ADC) 的不断发展，HIC 在抗体以及抗体偶联药物的表征与分析上应用越来越广泛。

通常使用疏水相互作用色谱 (HIC) 测定药物/抗体比率 (DAR)。 这种温和的非变性分析方法的洗脱液含有高浓度腐蚀性盐,对液相色谱 (LC) 系统提出了挑战。 Agilent 1290 Infinity II 生物液相色谱系统包括高速泵及其完全不含铁的流路,非常适合用于生物色谱条件,可避免对系统造成潜在的腐蚀性损坏。 本应用简报介绍了使用 HIC 测定本妥昔单抗 ADC 的DAR 。 经计算,DAR 为每个抗体 3.7 个药物分子。 所得结果具有良好的重现性,证明 1290 Infinity II 生物液相色谱仪作为新一代安 …