2021年9月10日 · （ELISA） 酶联免疫吸附测定是一种基于平板的免疫测定，用于检测和量化生物分子，如抗体、蛋白质、激素或肽，以及表征蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸的相互作用。 在 ELISA 中，通常是抗原，被固定在固体表面上，随后用与酶（如辣根过氧化物酶 (HRP) 或碱性磷酸酶 (AP) 偶联的抗体）进行探测。 定量是通过与底物一起孵育来实现的，底物由酶催化，产生可测量的副产物。 ELISA 检测传统上在 96 孔微孔板中进行。 这些板旨在被动结合和固定抗原，通 …

最为大家所熟悉的底物显色当数HRP（辣根过氧化物酶，Horseradish Peroxidase）和AP（碱性磷酸酶，Alkaline Phosphatase）。 1 HRP. 这是最常见的酶促发光或显色的交联酶，由于HRP比活高、分子量小、特异性强、稳定性好和作用底物范围广的优点而得到广泛使用。 HRP的底物主要包括化学发光底物和生色底物两大类，对于底物的选择，主要考虑的是灵敏度、背景和使用的方便性和稳定性。 生色底物 生色底物显色主要是利用底物在有HRP和H2O2的存在下失去电子而呈 …

碱性磷酸酶 (AP) -是水解酶，我们通常可通过比色底物 pNNP 测量 AP 的信号。 AP 标记的二抗. 生物素/链霉亲和素 - 当靶标的表达水平太低，不能仅靠二抗标记的抗体检测时，通常使用生物素/链霉亲和素。 许多生物素分子可偶联至二抗，而链霉亲和素对生物素的高亲和性提供了额外的优势。 通过这一放大步骤，并且通过将链霉亲和素结合于标记物（例如 HRP 或荧光探针），低表达水平的蛋白可更容易被检测。 在检测中，研究人员通常先加入生物素标记的二抗，然后加入链霉 …

pNPP，即4-Nitrophenyl phosphate disodium salt，中文全称4-硝基苯磷酸二钠，是碱性磷酸酶（AP）的底物，在酶（如碱性磷酸酶，AP）和辅助物质（如缓冲液和金属离子）存在的条件下，pNPP可以被酶催化水解为对硝基苯酚（pNP），pNP是一种黄色产物，其吸收峰位于405 nm左 …

The two very common enzyme probes used in immunoassays and chemiluminescence are horseradish peroxidase (HRP) and alkaline phosphatase (AP). These two enzymes have been used to detect biological compounds through chemiluminescence, chromogenic or fluorescent outputs.

ELISA中最常用的酶为 辣根过氧化酶 （HRP） 和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的 碱性磷酸酶 （AP）。 HRP在蔬菜作物辣根中含量很高，纯化方法也不复杂。 它是一种糖蛋白，含糖量约18％，分子量为 44kD，是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成的一种卟啉蛋白质。 主酶为无色糖蛋白，在275nm 波长处有最高吸收峰；辅基是深棕色的含铁卟啉环，在403nm 波长处有最高吸收峰。 HRP的纯度用RZ（ReinheitZahl，意为纯度数）表示， …

2018年11月5日 · 根据酶系来选择底物，可以分为HRP和AP底物系统。 HRP分子量小，稳定，便宜，反应快速，而AP分子量大，酶促反应慢。 FITC为异硫氰酸荧光素，本身就是黄绿色荧光，二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察;

另一种HRP的底物为3-（4-羟基）苯丙酸 [3-（4-hydroxy）phenly propionic acid,HPPA]，经HRP作用后，产物显荧光，可用荧光光度计测量。 用于Elisa的优点为可加宽定量测定的线性范围。 HRP对氢受体的专一性很高，仅作用于H2O2、小分醇的过氧化物和尿素过氧化 …

圣克鲁斯生物技术公司现提供一系列HRP和AP底物,适用于各种应用。 HRP (辣根过氧化物酶)和AP (碱性磷酸酶)底物是免疫测定和分子生物学技术中必不可少的试剂,用于检测特定蛋白质、核酸或其他生物分子的存在。

2024年5月13日 · HRP/AP 双酶双底物的双重免疫染色（间接法）——淋巴瘤轻链κ、λ的双重酶标记