2019年9月27日 · 本文将为大家介绍为什么单链供体模板（Single-stranded donor oligonucleotides, ssODN ）在 CRISPR 介导的同源重组（Homology directed repair, HDR）表现更优，以及如何设计最佳的 HDR 模板。 CRISPR-Cas9 通过使各种模式生物的基因组发生有效的位点特异性变化的方式来彻底改变基因组研究。 在 Cas9 蛋白使 DNA 发生双链断裂（Double-strand break, DSB）后，哺乳动物细胞能利用内源性 DNA 修复机制将断裂端连接在一起。 细胞修复断裂有 …

2023年7月25日 · 为了产生特定的序列变化，细胞必须经历同源定向修复 (HDR)，这是一种独特的细胞DNA修复途径。 实现这一点通常需要同时引入同源的DNA修复模板，如单链寡核苷酸 (ssODN)，其中包含想要引入编辑基因组的序列变化。 在干细胞等哺乳动物细胞中，HDR相对较少，DSBs主要由NHEJ修复。 虽然一些研究人员关注于提高总体HDR率的策略，但最近的研究表明，通过 (1)防止重新编辑来提高编辑精度和 (2)优化"剪切到突变距离"，可以更有效地通过HDR …

2024年12月10日 · Here, we review CRISPR-Cas9-mediated HDR, with a focus on methodologies for boosting HDR efficiency, and applications of precise editing via HDR. First, we describe two common mechanisms of DNA repair, non-homologous end joining (NHEJ), and HDR, and discuss their impact on CRISPR-Cas9-mediated precise genome editing.

In eukaryotic cells, repair of DSBs occurs primarily by two pathways: Non-Homologous End-Joining (NHEJ) and Homology Directed Repair (HDR). NHEJ is the canonical homology …

2024年8月10日 · By combining with an inhibitor of non-homologous end joining (NHEJ) or the HDRobust strategy, these modular ssDNA donors achieve up to 90.03% (median 74.81%) HDR efficiency. The HDR-boosting...

2022年7月8日 · HDR：DNA修复过程中的“同源重组”与“非同源末端链接”（CRISPR 必备知识）

2023年7月20日 · In this study, we report HDRobust, a high-precision method that, via the combined transient inhibition of nonhomologous end joining and microhomology-mediated end joining, resulted in the induction...

2020年3月4日 · 同源定向修复 (HDR)是真核生物中第二常见的dsb修复机制 (除了以HDR为主的芽殖酵母)。 与NHEJ不同，HDR依靠同源的修复模板 (通常是姐妹染色单体)来修复断裂的DNA。

2019年7月30日 · By defining the RAD18 domains required to promote HDR, we derive an enhanced RAD18 variant (e18) that stimulates CRISPR-mediated HDR in multiple human cell types, including embryonic stem...

2020年5月19日 · 通过 CRISPR-Cas9 生成双链断裂后，哺乳动物细胞会通过内源性细胞机制修复断裂的位点，典型的机制包括非同源末端连接（NHEJ）通路和同源介导修复（HDR）通路 [1]。