2023年10月12日 · IB：即指 免疫印迹 （immunoblotting）或 western blot （WB），用来检测目的蛋白的存在与否，例如图中“IB: Flag”是指用Flag抗体做WB检测，看样本中是否存在Flag标记的蛋白，IB：Myc的含义同理；值得注意的是，抗体应使用兼容IP实验的。

IP全称是immunoprecipitation，即 免疫沉淀，这一步主要是为了纯化目的蛋白。 IB全称是immunoblotting，即 免疫印迹，也就是常规的 Western Blotting，用于显示目的蛋白。 WCL全称是whole cell lysates，即整个细胞的裂解成分。 HC全称是heavy chain，即重链， LC全称是light chain，即轻链。 现在将图分为三部分，先看第一部分，即上面的部分，“+”表示含有这种蛋白，“-”表示没有，这个实验一共做了四组，从左到右分别为： （1）只表达HA-cGAS的 293T细胞； …

另外，Co-IP实验还需要设置一个阳性对照组（Input组），即直接利用抗体X/Y对细胞裂解液进行WB检测，验证细胞裂解液中蛋白X/Y的存在。 以Hsp70和 Apaf-1 为例

2024年1月10日 · 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）基于抗体和抗原之间的特异性/专一性作用用于研究蛋白质相互作用的金标准（gold standard）。 相较于pull down、酵母双杂交等研究蛋白互作的方法，其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内，保留了互作蛋白及复合体（complexes）的“内源”状态，但这些要能够达到IP级别抗体。 Co-IP实验基本过程包含四步：1、非变性蛋白提取物中添加抗体（IP级别抗体）；2、目标蛋白被抗体免疫特异性 …

2022年4月23日 · Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异性抗体间接捕获与其结合的靶蛋白（prey protein）。

2024年7月16日 · Co-IP是IP的延伸，主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。 其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话，那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时，另一个蛋白也会被同时沉淀下来。 基本原理也是抗原-抗体特异性结合，检测目的是蛋白间相互作用。 2、Co-IP优缺点. Co-IP优点： 操作流程较为简便，不需要事先制备大规模蛋白表达文库； 可以研究具有修饰的目的蛋白； 能够对间接相互作用的蛋白进行捕获，比 …

2023年7月6日 · co-ip组：用来证明研究的2个蛋白是否存在互作。 该组图表示在IP组的基础上进一步利用anti-GFP检测GFP标签，图上显示第一组实验没有条带，而第二组实验在130kd处有蛋白。

免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (Co-IP) 是利用固定在固相支持物上的抗体,从复杂的混合物中,富集或纯化特定蛋白质或蛋白质组的方法。 IP是许多蛋白质组工作流程中的重要步骤,用于研究蛋白质的存在、分子量大小、相对丰度、丰度的上调或下调、蛋白稳定性、翻译后修饰及相互作用等。 利用IP获得的纯化抗原可采用多种技术进行分析,如 ELISA 和 Western Blotting等。 分离所得的蛋白还可以在酶切后,通过质谱进行鉴定或定量分析。 最早的免疫沉淀方法,是将放射性前体 ( 如氨基 …

2024年6月5日 · Co-IP （免疫共沉淀，co-inmunoprecipitation）是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术，能够特异性富集所研究的目的蛋白。 由于过程中采用了非变性条件，保留了互作及复合体的细胞内状态。 相对于 酵母双杂交 、pull down等方法，其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内，保存了互作蛋白及复合体的“内源”状态。 一、Co-IP实验原理： 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经 …

免疫共沉淀（Co-IP）是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础，用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。 利用 免疫共沉淀 可以检测两个已知蛋白之间的相互作用，或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。