
Co-IP的结果解读 - 知乎 - 知乎专栏
IB全称是immunoblotting,即 免疫印迹,也就是常规的 Western Blotting,用于显示目的蛋白。 WCL全称是whole cell lysates,即整个细胞的裂解成分。 HC全称是heavy chain,即重链, LC全称是light chain,即轻链。 现在将图分为三部分,先看第一部分,即上面的部分,“+”表示含有这种蛋白,“-”表示没有,这个实验一共做了四组,从左到右分别为: (1)只表达HA-cGAS的 293T细胞; (2)共同表达HA-cGAS与NRLP14-FL的293T细胞; (3)只表达 STING -HA的293T …
免疫沉淀技术之Co-IP结果解读与分析 - 知乎 - 知乎专栏
2023年10月12日 · IB:即指 免疫印迹 (immunoblotting)或 western blot (WB),用来检测目的蛋白的存在与否,例如图中“IB: Flag”是指用Flag抗体做WB检测,看样本中是否存在Flag标记的蛋白,IB:Myc的含义同理;值得注意的是,抗体应使用兼容IP实验的。
一篇搞定 IP、co-IP 实验 - 丁香通研选
2022年4月23日 · Co-IP(co-Immunoprecipitation),免疫共沉淀: co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法,其基本实验流程和IP类似,通过使用诱饵蛋白(IP 中的抗原,bait protein)特异性抗体间接捕获与其结合的靶蛋白(prey protein)。 Pull-down: 另外一种进行蛋白-蛋白相互作用研究的方法,针对无法找到可用的抗体的靶蛋白。 可以采用一个表位标记蛋白质(可在细胞内组成型表达),将其固定在基质上获得互作蛋白。 很多蛋白质由于无法找到可 …
祖传Co-IP(免疫共沉淀)实验操作全流程,附结果图解读+疑难问 …
2024年7月16日 · Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。 其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时,另一个蛋白也会被同时沉淀下来。 基本原理也是抗原-抗体特异性结合,检测目的是蛋白间相互作用。 2、Co-IP优缺点. Co-IP优点: 操作流程较为简便,不需要事先制备大规模蛋白表达文库; 可以研究具有修饰的目的蛋白; 能够对间接相互作用的蛋白进行捕获,比 …
Co-immunoprecipitation (Co-IP): The Complete Guide
Co-immunoprecipitation (co-IP) is a powerful technique for the study of protein-protein interactions, based on the principle of immunoprecipitation (IP). A target protein is purified from a complex mixture along with its interacting partners using specific antibodies that are immobilized on a solid bead support.
CoIP+WB/MS快速发现体内互作蛋白 - 知乎 - 知乎专栏
coip-wb即免疫共沉淀与免疫印迹技术连用,可以验证诱饵蛋白与互作蛋白是否结合,再通过一系列功能实验确定某个信号通路,明确通路相关蛋白并进行验证。
Co-IP实验实操及实验结果解读 - 丁香园论坛 - DXY.cn
2024年1月10日 · 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)基于抗体和抗原之间的特异性/专一性作用用于研究蛋白质相互作用的金标准(gold standard)。 相较于pull down、酵母双杂交等研究蛋白互作的方法,其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内,保留了互作蛋白及复合体(complexes)的“内源”状态,但这些要能够达到IP级别抗体。 Co-IP实验基本过程包含四步:1、非变性蛋白提取物中添加抗体(IP级别抗体);2、目标蛋白被抗体免疫特异性 …
CoIP实验流程方法及质控,免疫共沉淀 - 百家号
2024年5月27日 · CoIP-MS/WB实验通过抗体沉淀蛋白-蛋白复合物,经分离纯化后分析目标蛋白的互作蛋白。详细步骤包括细胞收集裂解、免疫复合物制备、免疫沉淀、Western检测、银染及质谱分析,用于验证抗体质量、IP产物及质谱结果。
知无不“研”|一文读懂免疫共沉淀技术(Co-IP)-技术专题-金开瑞
Co-IP (免疫共沉淀,co-inmunoprecipitation)是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术,能够特异性富集所研究的目的蛋白。 由于过程中采用了非变性条件,保留了互作及复合体的细胞内状态。 相对于 酵母双杂交 、pull down等方法,其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内,保存了互作蛋白及复合体的“内源”状态。 一、Co-IP实验原理: 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确 …
免疫共沉淀Co-IP实验原理/实验流程-Co-IP实验设置/结果判定/应 …
免疫共沉淀实验中,会直接取细胞裂解液进行wb,用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白,即阳性对照。 Co-ip实验两个抗体需要不同种源吗 答:最好选择两个不同种源的抗体。
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