
一文读懂差示扫描荧光法(DSF) - 知乎专栏
差示扫描荧光法(Differential Scanning Fluorimetry, 简称DSF),是在荧光定量PCR仪上缓慢加热样品,在加热的过程中检测荧光染料与结构发生改变的蛋白质相结合的量,来评价蛋白质热稳定性的方法。
nanoDSF 微量差示扫描荧光法表征蛋白配体互作 - 知乎
2022年9月20日 · 差示扫描荧光法(DSF),也被称为thermal shift assay(TSA),是表征蛋白热稳定性的常用方法之一,广泛应用于蛋白配体互作表征,突变体、缓冲液、去垢剂筛选等领域。
Differential Scanning Fluorimetry (DSF) | Center for …
Conventional Differential Scanning Fluorimetry (DSF) uses a real-time PCR instrument to monitor thermally induced protein denaturation by measuring changes in fluorescence of a dye that binds preferentially to unfolded protein (such as Sypro Orange, which binds to hydrophobic regions of proteins exposed by unfolding).
Protocol for performing and optimizing differential scanning ...
2023年12月15日 · Differential scanning fluorimetry (DSF) is a widely used technique for determining the apparent melting temperature (Tma) of a purified protein. Here, we present a protocol for performing and optimizing DSF experiments. We describe steps for designing and performing the experiment, analyzing data, and optimization.
前沿进展:研究蛋白质热稳定性的几种方法-北京佰司特科技有限责 …
2024年7月22日 · 差示扫描荧光(DSF)也被称为热荧光法(ThermoFluor),是一种经济高效且易于使用的生物物理技术,通过检测当温度升高或变性剂存在时荧光发射光谱的相应变化来确定蛋白质的变性温度(热变性温度Tm值或化学变性Cm值)。
nanoDSF蛋白质稳定性分析实验服务 - 知乎 - 知乎专栏
荧光信号的比值会随着温度的增加或化学变性剂浓度的增加而变化,从而测定蛋白稳定性参数 T m 值。 nanoDSF 技术基于蛋白质内源荧光检测,不受任何缓冲液限制, 检测浓度范围非常广泛(5 μg/mL-250mg/mL)。 无论蛋白大小,无论是酶、抗体、抗体药物偶联物还是膜蛋白,PR 系列都能给出全面的分析结果。 nanoDSF尤其擅长缓冲液筛选、制剂配方以及储存条件测试。 用更好的稳定性分析结果做更好的决定。 Prometheus NT.48带有背反射光学模块主要用于检测蛋白的 …
药物筛选与靶标发现 | 差示扫描荧光法(DSF) - 企业动态 - 丁香通
2022年3月4日 · 差示扫描荧光法 (differential scanning fluorimetry, DSF) 是一种方便快捷的高通量药物筛选及靶标发现的方法,该方法具有蛋白样品损耗少、通量高、温度变化范围广及数据准确等优点,被广泛用于蛋白质稳定性(蛋白质热稳定性参数及其影响因素)、蛋白结构和构象、蛋白-配体相互作用及蛋白质稳定剂、抑制剂、辅助因子等领域的研究。 差示扫描荧光法(DSF)以荧光染料为指示剂,检测蛋白的热稳定性。 目前最常用的染料是 SYPRO Orange,SYPRO Orange …
Fluorescence-Based Protein Stability Monitoring—A Review
Many of the fluorescence-based assays fill these criteria, and thus are often used when highly accurate and special information for protein stability is not needed. The thermal shift assay (TSA), also referred to as DSF or ThermoFluor TM, is a cost-effective, parallelizable, practical, and accessible biophysical technique .
差示扫描荧光法DSF的介绍及其在蛋白质稳定性筛选等方面的应用_ …
2025年1月22日 · 差示扫描荧光法(Differential Scanning Fluorimetry,DSF),又称热迁移分析(Thermal Shift Assay,TSA)或ThermoFluor,是一种成本效益高、可并行化、实用且易于使用的生物物理技术(图1)。 因此,它被广泛用作跟踪蛋白质折叠状态和稳定性以及相互作用等研究。 传统的DSF使用实时荧光定量PCR仪,通过测量优先与未折叠蛋白质结合的染料(如SYPRO Orange,它与蛋白质因折叠而暴露的疏水区域结合)的荧光变化来监测热诱导的蛋白质变性 …
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全新一代差示扫描荧光仪SUPR-DSF
使用SUPR-DSF 获得NISTmAb (NIST 单抗标准品) 的差示扫描荧光数据,并将结果与差示扫描量热法 (DSC) 所获得的数据进行比较。 SUPR-DSF 可以解析NISTmAb所有的三个结构域: CH2(69°C),CH3 (83°C) ,和Fab区域(94°C)。 SUPR-DSF 的最高扫描温度为105°C,可以精确测量异常稳定的Fab区域熔解温度,而其他DSF平台的扫描最高温度一般仅为95°C,容易丢失单抗Fab区域去折叠变性的重要信息 ( 图5(a) )。 15 个单点突变体。 在1.5小时内,384 孔的数据)。 用模型对数.