
Protein engineering of α-ketoisovalerate decarboxylase for …
2018年5月1日 · Heterologous expression of the enzyme α-ketoisovalerate decarboxylase (Kivd) in the unicellular cyanobacterium Synechocystis PCC 6803 results in cells producing isobutanol and 3-methyl-1-butanol, with Kivd identified as a potential bottleneck.
Integrative genomic mining for enzyme function to enable ... - Nature
2015年11月24日 · To produce longer-chain alcohols through the synthetic recursive +1 carbon elongation pathway, we demonstrate that modulating the specificity of a single enzyme in the pathway could redirect...
Saturated mutagenesis of ketoisovalerate decarboxylase V461 …
2017年9月12日 · In this work, preferential tuning of the Lactococcus lactis ketoisovalerate decarboxylase (Kivd) specificity toward 1-pentanol synthesis was achieved via saturated mutagenesis of the key residue...
在大肠杆菌中表达酮酸脱羧酶产异戊醇 - 仁和软件
2015年1月14日 · 本研究拟通过增加核糖体结合位点rbs优化表达条件,利用大肠杆菌强启动等策略,将乳酸乳球菌的酮酸脱羧酶基因 kivD 通过PCR扩增连接到大肠杆菌高效表达载体pET-28a (+)上,以实现其高效表达,为今后构建高产异戊醇工程菌株奠定基础。 本实验使用的菌株、质粒见 表 1。 乳酸乳球菌MRS培养基:1%酪蛋白,1%牛肉膏,0.5%酵母提取物,0.5%乙酸钠,0.2% 柠檬酸二钠,0.1% 吐温80,0.2% 磷酸氢二钾,0.02%七水硫酸镁,0.005% 水合硫酸锰;大肠杆 …
异丁醇的生物合成途径是将缬氨酸前体2-酮异戊酸通过2- 酮异戊酸脱羧酶(KivD)代谢成异丁醛, 然后由醇脱氢酶(AdhA) 还原成异丁醇( 图1)。 大肠杆菌自身没有2-酮异戊酸脱羧酶和以辅酶I 为辅酶的醇脱氢酶, 因此需要外源引进这两个基因并使其表达。 本研究将乳酸乳球菌1.2829 的kivD 和adhA基因单独或串联克隆到大肠杆菌DH5α 宿主中进行表达, 从而合成异丁醇, 并研究了KivD 和AdhA酶活的最适温度和pH。 1.1.1 菌种和质粒: 乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 1.2829购自中 …
α-酮异戊酸脱羧酶的生化和分子特征,一种参与乳酸乳球菌从氨基 …
kivd 基因由一个 1647 bp 的开放阅读框组成,该框架编码一个 61 kDa 的推定肽。 对推导的氨基酸序列的分析表明,该酶是一种非氧化硫胺二磷酸 (ThDP) 依赖性α-酮酸脱羧酶,包括在酶的丙酮酸脱羧酶组中。 活性酶是一种均四聚体,在 45 摄氏度和 pH 值 6.5 下表现出最佳活性,并表现出金属依赖性酶的典型抑制模式。 除了 Mg (2+),在其他二价阳离子如Ca (2+)、Co (2+) 和Mn (2+) 存在下观察到活性。 该酶对 α-酮异戊酸(缬氨酸和亮氨酸生物合成中的一种中间代谢物)显示 …
一种α-酮酸脱羧酶KIVD-LL及其编码基因和应用 One kind of α- keto acid decarboxylase KIVD ...
2017年1月11日 · 本发明通过基因工程的方法,获得了对α酮异戊酸与α酮异已酸均具有较高脱羧活力的α酮酸脱羧酶KIVDLL,该酶在生物合成异戊醇工业中具有较大的应用潜力. The present invention by genetic engineering, won the α- keto acid decarboxylase KIVD-LL of α- and α- keto acid isobutyl ketone iso already have high acid decarboxylation dynamic enzyme in the biosynthesis of iso-amyl alcohol industry It has great potential.
Regulation of alpha-ketoisovalerate decarboxylase expression …
The alpha-ketoisovalerate decarboxylase (Kivd) is a unique lactococcal key enzyme in the decarboxylation of branched-chain alpha-keto acids derived from branched-chain amino acids transamination into aldehydes. These products are important aroma compounds produced during cheese ripening.
Biochemical and molecular characterization of alpha …
2004年9月15日 · The kivd gene consisted of a 1647 bp open reading frame encoding a putative peptide of 61 kDa. Analysis of the deduced amino acid sequence indicated that the enzyme is a non-oxidative thiamin diphosphate (ThDP)-dependent alpha-keto acid decarboxylase included in the pyruvate decarboxylase group of enzymes.
一种α-酮酸脱羧酶KIVD-LL及其编码基因和应用的制作方法
本发明通过基因工程的方法,获得了对α-酮异戊酸与α-酮异已酸均具有较高脱羧活力的α-酮酸脱羧酶KIVD-LL,该酶在生物合成异戊醇工业中具有较大的应用潜力。 [0001] 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种α -酮酸脱羧酶KIVD-LL及其编码基因 和应用。 [0002] 长链醇类不仅是一种重要的化工原料,用于有机合成,同时也被认为一类新兴的 能源替代品。 3-甲基-1-丁酮(异戊醇),是酒精发酵副产物"杂醇油"的主要成分,其在 化学制药、溶剂、香精、有机合成等行业有着非常 …