利用了大肠杆菌自身强大的同源重组系统，使SLIC成为一种便宜且可使多个DNA片段快速组装的方法，下面介绍如何在研究中应用SLIC。 01LIC：不依赖于连接的克隆. 不依赖于连接的克隆（Ligation-independent cloning，LIC）是在1990s首次开发出来的。

2007年，来自于哈佛医学院的Li等人建立了不依赖序列和连接的克隆方法（Sequence and ligation-independent cloning，SLIC）。 SLIC方法不受目的序列和连接反应的限制，能将任意、多个DNA片段组装起来，在体外完成重组反应，用途非常广泛。 利用T4 DNA聚合酶的3'-5'外切酶活性，在22℃条件下消化DNA片段，产生含有同源序列的5'-ssDNA突出端。 突出端长度可通过dCTP控制； 利用大肠杆菌自身的修复系统使其形成完整的环状质粒。 图3. SLIC法构建表达载体的步 …

一步等温反应可以说是slic的升级版，只是其中用到了dna连接酶，所以我们单独归为一种，它极大的简化了体外重组克隆的程序。 文中所介绍的几种新型的体外重组克隆方法各有特点（表1），我们可以根据我们的目的及手中的材料合理的选择。

LIC（音“立刻”）技术，全称为 ligation–independent cloning （不依赖于连接反应克隆），已经在表达载体的构建方面得到了广泛应用。 LIC技术 提高了表达载体构建过程中的连接效率，降低了克隆产物假阳性率，是一个对初学者极其友好的分子克隆手段。

slic是一种标准化的多片段dna组装方法，其低成本使其非常适合需要进行大量克隆的研究人员。 与Gateway克隆技术不同，该方法的组装是无痕的，而且该方法的灵活性允许PCR产生的不同类型的片段的插入。

Li & Elledge所建立的不依赖序列和连接的克隆方法 (sequence and ligation-independent cloning，SLIC)就能满 足上述要求．该方法不受DNA序列的限制，可以将任 意序列的多个DNA片段组装到一起，而且不需要连接 反应即可完成体外的重组．

Ligation Independent Cloning (LIC) is a technique developed in the early 1990s as an alternative to restriction enzyme/ligase cloning. Inserts are usually PCR amplified and vectors are made linear either by restriction enzyme digestion or by PCR.

2021年6月9日 · slic 是一种用于多片段 dna 组装的标准化方法，其低成本使其成为进行大量克隆的研究人员的理想选择。 与 Gateway 克隆不同，组装是无疤痕的，并且该方法的灵活性使其能够与不同类型的 PCR 生成的插入物一起使用。

不依赖于连接反应的高效克隆方法(ligation–independent cloning, LIC)是以同源重组的基本原理，利用T4 DNA聚合酶的3′-5′外切酶活性在待插入片段以及线性载体的末端产生单链突出，通过同源序列在体外完成交换重组，达到基因克隆目的。

2020年8月27日 · USER-LIC主要是通过USER酶混合物（USER enzyme mix）特异性识别和删除扩增的双链DNA片段中的尿嘧啶核苷酸，从而实现重叠DNA序列长度的可控 。USER酶混合物主要包括尿嘧啶DNA糖苷酶（uracil DNAglycosidase，UDG）和DNA 糖基化酶-裂解酶 Endo VIII（DNA glycosylase-lyase endo VIII）；尿 ...