D10A突变 使RuvC结构域失活，因此该Nickase只切割目的链。 相反，HNH结构域中的 H840A突变 会产生可以使非目标链断裂的Nickase。 使用Cas9 Nickase和两个gRNA可以创建交错切割，而不是用WT直接切割两条链。

和普通Cas9不同的是，Cas9n (Cas9 Nickase)上有一个D10A的氨基酸突变，这个突变使得Cas9不再导致DNA双链断裂和NHEJ修复（一种会引来突变的修复），而是会引起单链断裂和BER修复（一种不会引起突变的修复），如下图。

2023年3月30日 · To increase their editing efficiency, dCas9 is replaced with nCas9 (D10A). Unlike dCas9, nCas9 (D10A) nicking of the target strand stimulates cellular repair mechanisms, which leads to...

两种 SpCas9 变体，即 nCas9 (D10A) 和 nCas9 (H840A)，分别切割目标（引导 RNA 配对）和非目标 DNA 链，被广泛用于各种目的，包括配对切口、同源定向修复、基础编辑和主要编辑。

2016年4月15日 · Here, we describe a Cas9 D10A -based screening approach that combines an All-in-One Cas9 D10A nickase vector with fluorescence-activated cell sorting enrichment followed by high-throughput...

2019年8月10日 · Cas9 Nickase是Cas9的一种突变形式，其RuvC1 或HNH-like核酸酶域中分别有D10A 或H840A 突变，这种突变形式导致在目标位点产生单链刻痕而不是双链断裂。 由于单链断裂（或缺口）通常使用完整的互补DNA链作为修复模板通过HDR 途径快速修复，因此Cas9 Nickase可将脱靶效应 ...

2023年9月21日 · 通过nCas9(D10A)-PmCDA1编辑并进行深度测序分析三个基因间目标序列。 针对目标PAM序列的相对位置从-31到9个碱基的SNV频率被绘制出来。 右上角的插图显示了从-20到-13位置的核苷酸变化比例，C到T（黄色）、C到G（红色）和C到A（蓝色）。

2023年9月18日 · In this study, we developed a low-toxicity CRISPR/Cas9 D10A nickase (nCas9)-based genome editing tool in the model strain Streptomyces coelicolor M145. We showed that in the presence of both targeting sgRNA and Cas proteins, utilization of nCas9 instead of Cas9 significantly reduced the toxicity to the host and greatly enhanced cell survival.

2016年4月15日 · Here, we describe a Cas9 (D10A)-based screening approach that combines an All-in-One Cas9 (D10A) nickase vector with fluorescence-activated cell sorting enrichment followed by high-throughput genotypic and phenotypic clonal screening strategies to generate isogenic knockouts and knock-ins highly efficiently, with minimal off-target effects.

2023年3月30日 · Two SpCas9 variants, namely, nCas9 (D10A) and nCas9 (H840A), which cleave target (guide RNA-pairing) and non-target DNA strands, respectively, are widely used for various purposes, including paired nicking, homology-directed repair, base editing, and prime editing.