方法 以raw 264.7细胞株为研究对象，首先采用不同浓度的多聚甲醛分别固定10、30 min，1、2、4 h，进行ros和dapi检测；再用不同的固定试剂分别在ros检测前和后固定，检测ros荧光强弱；将dapi在dcfh-da探针加入前12、4、2、1 h，20 min加入和两者同时加入，检测dapi染色情况 ...

1、先装载荧光探针，再用甲醇固定，然后dapi染细胞核 装载DCFH-DA后，阳性对照荧光标记率较高，但是着色不均匀。 甲醇固定20min，DAPI染色5-10min后，绿色荧光找不到。

2016年7月12日 · 结论 dcfh-da 探针法检测 Ros 荧光时不能与细胞固定连用;dapi 在 dcfh-da 探针孵育前 12 h 加入，并不影响 Ros 荧光的产生和检测，该研究方案可有效实现 Ros 与 dapi 的共染。

活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit，也称ROS Assay Kit)是一种利用荧光探针 DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。

目的利用二氯荧光黄二乙酸酯(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针和4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(4',6'-diamidino-2-phenylindole,DAPI)探讨影响活性氧(reactive oxidative species,ROS)和细胞核共染的因素,以优化最佳的研究方案.方法以RAW 264.7细胞株为研究对象,首先采用不同浓度 ...

1、染色：冰冻切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内滴加ROS染液，避光恒温箱37°孵育30min。 2、DAPI复染细胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

However, with the increase of staining time, the more the cell nuclei were labeled with DAPI, the less the fluorescence in tensity of ROS was. These results suggest that DAPI damages the storage of intracellular ROS during the nuclei staining, thus disturbing the experimental results.

19 小时之前 · After counterstaining with 4ʹ-6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, Sigma), the fluorescence intensity induced by ROS was measured using a TECAN Spark microplate reader (TECAN, Männedorf ...

3 天之前 · Ery and Xyl reduced ROS levels in HEK-293 cells and influenced membrane permeability. Notably, Xyl increased vesicle adsorption on the cell membrane at the same concentration. ... (DAPI, ≥98% ...

活性氧 （ROS）是细胞内引起氧化应激损伤的主要活性物质，因此对细胞内ROS水平进行测定是进行有关病理机制研究和治疗效果评价的重要实验内容之一。 目前，最常用的测定细胞内ROS水平的方法是利用 荧光探针 DCFH-DA进行检测。 本期，我们联系到了来自中国科学院长春应用化学研究所的张老师，在对细胞内活性氧水平测定的操作过程中，她充分积累了自己的心得和经验，并将自己的研究成果发表在 Advanced Science 上。 以下是张老师分享的一些相关经验，一起来实 …