Kcat/Km就可以用来确定酶的最适底物，同一个酶对不同底物的Kcat/Km最大可相差100万倍。 当利用蛋白质工程对酶进行改造时，不同突变型的Kcat/Km也是需要测定的参数，用来表征酶催化效率的变化情况。

当v=0.5Vmax时，Km= [S]，可见Km等于酶促反应的初速率为最大速率Vmax一半时的底物浓度。 Km值一般在10-6~10-2mol/L之间，单位一般为mM或者uM。 Km只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。 将上面非线性回归得到的Vmax（活度）值按上面的公式换算就得到了nKat值，进一步除以每管反应蛋白的量（mg）,就得出了标准Vmax（nkat×mg-1protein）的值。 由于反应体系是1ml,则变化量为 c (NADPH)=175.4-158.5=17nM，所以活度 0.1182/min对应17nM的NADPH变化 …

Km是 米氏常数，定义为Km= (k-1+k2)/k1，物理意义是反应速度达到Vm一半时的底物浓度。 Ks是酶与底物复合物的 解离常数，定义为Ks=k-1/k1。

kcat称为酶的催化常数或转换数或周转数，具体是指在单位时间内，一个酶分子将底物转变成产物的分子总数。 kcat的单位是s-1。 如果一个酶遵守米氏方程，则kcat＝k2＝Vmax/Et。 （4）解读kcat/Km. kcat/Km通常被用来衡量酶的 催化效率,可以表示一个酶的催化效率或者完美程度。 大的kcat和（或）小的Km将给出大的kcat/Km值。 （5）几种酶的动力学参数. 直接使用米氏方程中的v对 [S]作图得到的是一条曲线，从图中虽然也能得到Km 值和Vmax值，然而，由于实验误差 …

2013年7月8日 · 测定Km、Vmax，一般用作图法求得。 作图法有很多，最常用的是Linewaver-Burk作图法，该法是根据米氏方程的倒数形式，以1/v对1/ [S]作图，可得到一条直线。

2017年12月13日 · Km值一般在10-6~10-2mol/L之间，单位一般为mM或者uM。 Km只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。 由于Km值与酶的浓度无关，所以计算时无需对蛋白进行定量，理论上诱导破碎的菌体上清（粗酶液）即可用来测酶活计算。

Km is a substrate concentration and is the amount of substrate it takes for an enzyme to reach V max /2. On the other hand V max /2 is a velocity and is nothing more than that. The value of Km is inversely related to the affinity of the enzyme for its substrate.

2016年7月19日 · 从上图中我们可以很容易的计算出Vmax和Km: Vmax是线性方程纵截距的倒数，Km是线性方程横截距倒数的相反数。 Lineweaver-Burk双倒数法通常能够比较准确的测定出Km与Vmax，但是双倒数的方法有一个问题，就是使低浓度的数据点占据了过高的权重。

2024年10月1日 · The ratio of kcat to Km (kcat/Km) is an important measure of an enzyme’s efficiency. It combines the rate of catalysis and the affinity of the enzyme for its substrate, providing a comprehensive measure of enzyme performance.

Km 值一般在 10-6~10-2mol/L 之间，单位一般为 mM 或者 uM。 Km 只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。 由于 Km 值与酶的浓度无关，所以计算时无需对蛋白进行定量，理论上诱导破碎的菌体上清（粗酶液）即可用来测酶活计算。