2017年10月26日 · sgRNA 是大名鼎鼎的基因编辑神器 Cas9 系统的“指挥中心”，可以引导 Cas9 对 DNA 进行定点编辑。经过无数大牛的积极探索，逐渐成熟的 Cas 9 基因编辑技术因其操作简单 …

通过创造性地连接tracrRNA-crRNA为嵌合RNA——sgRNA（single guide RNA），简化的操作过程：sgRNA的在PAM的参与、Cas9的介导下与双链DNA配对，Cas9的2个活性中心切割靶 …

基因编辑：将sgRNA与Cas9蛋白表达载体转化植物，实现目标基因的敲除或敲低。 获得MiMe突变株： 经过基因编辑后，获得基因敲除或敲低的MiMe突变株，这些突变株的生殖细胞在减数分 …

3.sgRNA骨架：除了特异性靶向序列之外，sgRNA还包含一个骨架结构，这有助于sgRNA的稳定性和与Cas9蛋白的结合。 4.特异性和副作用最小化： 设计sgRNA时，需要考虑其特异性，确保 …

序列验证：验证所选sgRNA靶点周围没有多态性，并通过生物信息学工具检查其在基因组中的唯一性。 2. 构建AAV载体. Cas9和sgRNA的表达：构建一个AAV载体，通常包括一个驱动Cas9蛋 …

为了方便实验设计以及提高gRNA的稳定性，Jennifer Doudna和Emmanuelle Charpentier将crRNA和tracrRNA融合成一条RNA链条，并把其称为sgRNA (single-guide RNA)。 与 …

向导RNA（guide RNA，gRNA），也称为小向导RNA（small guide RNA，sgRNA）。是作用于动质体（kinetoplastid）体内一种称为RNA编辑（RNA editing）的后转录修饰过程中。也是一种 …

初学CRISPR/Cas9，设计sgRNA的时候，只知道设计图中蓝色部分的20个序列，但是不明白黑色部分和红色部分的…

tracrRNA与crRNA融合即sgRNA，并与Cas9结合。 4、靶标识别： CRISPR/Cas9复合物扫描入侵的DNA，寻找与crRNA间隔序列互补的序列。 识别过程中，crRNA的间隔序列与目标DNA（ …

sgRNA设计的合理与否，对于CRISPR-Cas9编辑系统的切割效率，甚至最后能否得到KO细胞具有重要影响。 目前虽然有诸多高效快速的gRNA设计工具，但我们仍需了解基本的设计原则才能 …