2021年3月1日 · (1) 氯喹 (Chloroquine ，CQ) 处理，检测自噬流中 LC3B-II 变化 在酸性溶酶体中，氯喹会使溶酶体 pH 值升高，使溶酶体中酸性水解酶失活 ，从而抑制细胞内自噬溶酶体的融合与降解。

氯喹可以通过抑制溶酶体功能（比如升高它的pH值），抑制LC3-II的降解；巴佛洛霉素A1则是一种强效V-ATPase抑制剂，阻断溶酶体依赖的降解。 在“堵漏”的前提下，根据一段时间内LC3-II的积聚程度，LC3-II/ LC3-I的比值，判断自噬的改变。 通常情况下认为LC3-II/ LC3-I大于1即认为有自噬的发生。 目前的LC3抗体所检测的抗原表位都位于LC3的N端，由于PE基团结合导致N端区域的构象变化，使得抗体对LC3-II的亲和性更高，LC3-II/ LC3-I的比值存在较大的误差。 LC3-II条带显 …

LC3-I 通过 Atg7 和 Atg3 （分别对应 E1 和 E2 样酶）参与的泛素样反应，使磷脂酰乙醇胺 （PtdEth，PE）偶联，生成脂质化形式的 LC3，也称作 LC3-II，它可以附着到 自噬体 （autophagosome）的膜上，是自噬体的结构蛋白。

比如如果是溶酶体降解lc3出现了问题，照样可以导致自噬啊。 但是我用CQ再把溶酶体抑制掉，如果LC3还能上升，说明就是真的自噬产生了。 wangkai0418

lc3全称map1lc3 ，贯穿整个自噬过程，是目前公认的自噬标记物。哺乳动物的lc3可分为三种：lc3a、lc3b和lc3c。其中，lc3b应用广泛。 lc3蛋白合成后被atg4剪切掉c端5肽，暴露甘氨酸残基，产生胞浆定位的lc3-i。

在哺乳动物中，存在 4 种LC3 同工型（LC3A、LC3B、 LC3B2和 LC3C），在不同的组织细胞中表达会有差异。 目前主要研究的是LC3A和LC3B， LC3A 主要在 大脑 中表达，其他组织的表达较低。 LC3B 在 脑、内分泌组织 等有较高的表达，在肝脏、结肠、心肌、脾脏等基本不表达。 LC3B2 许多组织中都有较高的表达， 在骨骼肌中基本不表达。 点击放大图片. 图3 人体组织中LC3A、LC3B、LC3B2的蛋白表达水平差异（来源：The Human Protein Atlas） 点击放大图片. LC3-I …

LC3 是一种可溶性蛋白质，分子量约为 17 kDa ，在真核生物中广泛分布。 它以剪接 变体 LC3A、LC3B 和 LC3C 的形式表达，这些变体具有独特的组织分布。 所有 LC3 亚型都会经历翻译后修饰，尤其是在自噬过程中结合 PE（脂质化）。 在自噬信号 下，LC3 的胞质形式 (LC3-I) 与 PE 结合形成 LC3-PE 结合物 (LC3-II)，后者被招 募到自噬体膜上。 LC3-I 和 LC3-II 有何意义？ 哪种免疫测定方法最适合区分它们？ 翻译后，未加工形式的 LC3 (pro-LC3) 被 Atg4 蛋白酶水解，形成 …

Briefly, we pretreated the cultured cells with lysosomal inhibitor CQ for 1 h before TM, then compared changes in LC3 expression with those in the absence of CQ. The results showed a marked...

目前测量自噬通量的主要方法之一是监测 LC3 周转率，当用溶酶体试剂 (如氯化铵、Chloroquine 或 Bafilomycin A1) 或溶酶体蛋白酶抑制剂 (如 E64d) 处理细胞时，LC3-II 的降解被阻断，导致 LC3-II 的积累。因此，样品之间 LC3-II 量的差异代表了被递送到溶酶体进行降解的 LC3 ...

2017年1月1日 · During autophagy, cytoplasmic LC3 is processed and recruited to the autophagosomal membranes; the autophagosome then fuses with the lysosome to form the autolysosome. Therefore, cells undergoing autophagy can be identified by visualizing fluorescently labeled LC3 puncta and/or the co-localization of fluorescently labeled LC3 and lysosomal markers.