用PBS( 不含钙镁离子) 轻轻冲洗一遍。 加入2.5 ml 的0.25 胰酶( 含EDTA) 至培养瓶, 轻轻晃动,使胰酶覆盖底面, 置于37°C 培养箱内消化细胞。 在显微镜下观察, 直至细胞层全部脱落( 一般需要1-2 min)。 加2.5 ml MEF 完全培养液终止消化。 以1000 rpm, 离心5 min, 弃上清。

一般地，P0代MEF细胞传至P3代时，可以进行丝裂霉素C（Sigma，M0503）处理。 处理过后的MEF细胞不再增殖，可直接作为feeder使用。

2025年3月5日 · 将MEF P0细胞冻存管从液氮中取出，置于37℃水浴中使之迅速融解，取出后拿到超净台内用75%酒精擦拭冻存管旋口处及外壁，防止污染。

wash confluent (passage No. 0 - "P0") dishes once with PBS, then trypsinize (1-2ml per 10cm dish). Rock plates at room temperature after a few min. Inactivate the trypsin by adding some MEF medium.

In this article, we utilize an alternative procedure for gently dissociating fibroblasts from embryonic mouse tissue. The simple and reliable procedure significantly improves the yield and overall cell health and is applicable to a variety of mouse strains, including pathogen-free mice and genetically modified disease mice.

) 产品编号:PWL049 产品描述 小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts, MEFs)是适用于小鼠或人胚胎干细胞(ESCs )及诱导多能干. 细胞(iPSCs )的饲养层细胞。能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES 细胞增殖的因子,能够有效促进ES细胞的增殖并维�. 其未分化特性和多能性。胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)在体外极易分化,必须在培养基中加入分化抑制因子或将其培养在能分泌分化抑制因子的饲�. 层细胞上才能维持培养。因此,对于有饲养层的多能干细胞扩增培养, …

小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse embryonic fibroblasts, MEFs）是适用于小鼠或人胚胎干细胞（ESCs）及诱导多能干细胞（iPSCs）的饲养层细胞。 能产生抑制ES细胞自主分化和促 …

2021年8月24日 · 一般地，P0代MEF细胞传至P3代时，可以进行丝裂霉素C（Sigma，M0503）处理。 处理过后的MEF细胞不再增殖，可直接作为feeder使用。 传至P3代的MEF细胞长至80%以上时，吸出旧的MEF完全培养液，加入含丝裂霉素C（终浓度10 mg/ml ）的新鲜MEF完全培养液（以T75培养瓶为例，加入培养液的体积为10ml ）。 37℃培养箱温育处理3小时。 吸出培养液，用PBS快速洗4遍以去除残余的丝裂霉素C。 消化细胞、细胞计数并冻存。 一般地，一个T25培 …

一般地，P0代MEF细胞传至P3代时，可以进行（Sigma，M0503）处理。 处理过后的MEF细胞不再增殖，可直接作为feeder使用。 传至P3代的MEF细胞长至80%以上时，吸出旧的MEF完全培养液，加入含裂霉素C（终浓度10 mg/ml ）的新鲜MEF完全培养液（以T75培养瓶为例，加入培养液的体积为10ml ）。 37℃培养箱温育处理3小时。 吸出培养液，用PBS快速洗4遍以去除残余的裂霉素C。 消化细胞、细胞计数并冻存。 一般地，一个T25培养瓶铺1´106细胞。 更有优质直播、 …

一般地，P0代MEF细胞传至P3代时，可以进行丝裂霉素C（Sigma，M0503）处理。 处理过后的MEF细胞不再增殖，可直接作为feeder使用。