Takashi Yamamoto实验室利用MMEJ创建了CRISPR基因敲入的新方法，命名为PITCh (精确整合到目标染色体中)。 利用它们的PITCh质粒，可以在大约一个半月的时间内创建GFP敲入细胞系，而不需要进行复杂的同源臂克隆。 DNA双链断裂后的修复方法主要有3种。 HDR从具有两侧序列同源性的修复模板中复制该序列，用于精确的DSB修复。 NHEJ以易错的方式连接DSB的末端，常见的有插入和删除。 相比之下，MMEJ利用DNA双链断裂 (DSB)两侧5-25bp的区域进行DNA …

Microhomology-mediated end joining (MMEJ), also known as alternative nonhomologous end-joining (Alt-NHEJ) is one of the pathways for repairing double-strand breaks in DNA. As reviewed by McVey and Lee, [ 1 ] the foremost distinguishing property of MMEJ is the use of microhomologous sequences during the alignment of broken ends before joining ...

2018年3月5日 · Here, we present a method for scarless selection marker excision using engineered microhomology-mediated end joining (MMEJ). By overlapping the homology arms of standard donor vectors, short...

2019年4月4日 · NHEJ通路是大多数细胞中占主导地位的DSB修复通路。MMEJ通路通过末端切除来发现断裂两侧的微小同源序列，这些同源序列可用于模板化断裂端融合。PARP-1可通过MMEJ通路调控DSB修复。用PARP-1抑制剂rucaparib治疗细胞可降低DSB在MMEJ修复通路中的通量。

2019年4月4日 · 横向比较： CRISPR-Cas9基因标记使用的方法有（1）同源修复HR，（2）非同源end-joining NHEJ，（3）微同源介导的end-joining MMEJ。 虽然HR的方法可以非常精准的knockin，但它的载体的构建和效率远低于end-joining的方法。

2017年1月13日 · MMEJ is an error-prone repair mechanism for DSBs, which relies on exposed microhomologous sequence flanking broken junction to fix DSBs in a Ku- and ligase IV-independent manner. Recently, significant progress has been made in MMEJ mechanism study.

2017年6月5日 · 该研究设计了一种以同源臂介导的末端接合（Homology-Mediated End Joining, HMEJ）为基础的基因敲入策略，它在很多种系统（体外培养的细胞、动物胚胎和体内组织）中比现有的基因敲入策略的效率都要高。 基于更高效的编辑效率和更好的精确度，HMEJ介导的基因敲入方法为一系列应用，包括基因编辑动物模型的建立、疾病的靶向基因治疗等提供了非常大的应用前景。 在体外使用基于HMEJ的方法进行基因组编辑.

mmej可以用于基因编辑技术，如crispr/cas9系统ຫໍສະໝຸດ baidu来实现基因组的精确插入或缺失。而nhej通常只能实现基因组的随机插入或缺失。 mmej和nhej是两种不同的修复dna双链断裂的途径，它们各有优缺点，也有不同的生物学意义。

2019年4月25日 · 他们推断如果微同源介导的末端连接（microhomology-mediated end joining, MMEJ）途径可以被有效利用，而不是利用同源介导修复途径，它将会移除重复序列并恢复基因的功能序列。

MMEJ利用了来自HR的独立机制，并且它需要极短的同源序列（5-25 bp）来进行DSB修复，从而可以通过更容易构建的供体载体进行精确的基因敲入。 在这里，我们描述了用于PITCh敲入的简化协议，包括PITCh载体的设计和构建，并通过转染将其递送至人细胞系，或通过显微注射将其递送至青蛙胚胎。 PITCh载体的构建仅需几天，整个过程大约需要1.5个月才能建立敲入的细胞，或者从注射到青蛙胚胎的早期基因分型大约需要1周。 可编程核酸酶通过利用内源性DNA双链断 …