
土壤假单胞菌亚磷酸盐脱氢酶的基因克隆和原核表达及其酶活分析
摘要:亚磷酸盐脱氢酶(PTDH)以NAD + 为辅助因子催化亚磷酸盐氧化生成正磷酸盐和NADH,在辅酶再生和基于亚磷酸盐的磷利用等方面有着潜在重大的应用价值。 以土壤宏基因组DNA为模板,采用两轮PCR扩增得到全长亚磷酸盐脱氢酶基因 PsPtx。 通过酶切将它克隆到质粒pET32a(+)中,构建了原核表达载体pET(PsPtx)。 序列分析表明, PsPtx 基因的完整编码区大小为1 011 bp,其推导蛋白由336个氨基酸组成,理论分子量大小为36.5 kD。 保守结构域 …
用于改造亚磷酸盐脱氢酶(PTDH)以循环正交氧化还原辅因子的 …
2022年9月10日 · 随后,该作者证实PTDH突变体LY-13可以高效的合成左旋二酮,总转化数TTN高达45000,是目前为止报道的针对非经典辅因子的最高数值。 由于LY-13有较低的Km值(Km = 0.62 ± 0.05 mM),因此可以使生物转化在较低的NMN+浓度下进行。 另外,作者也证实了突变体LY-7及LY-13也可以用于循环成本更低的辅因子BNA+(Fig. 4)。 总之,该研究初步证实了基于Gor的高通量选择平台可以应用于筛选能利用非典型辅因子的酶,为后续深入研究及应用奠定 …
ABSTRACT: Phosphite dehydrogenase represents a new enzymatic system for regenerating reduced nicotinamide cofactors for industrial biocatalysis. We previously engine-ered a variant of phosphite dehydrogenase with relaxed cofactor specificity …
P450BM3 fused to phosphite dehydrogenase allows phosphite-driven ...
2016年11月29日 · To facilitate the wider application of the NADPH-dependent P450 BM3, we fused the monooxygenase with a phosphite dehydrogenase (PTDH). The resulting monooxygenase-dehydrogenase fusion enzyme acts as a self-sufficient bifunctional catalyst, accepting phosphite as a cheap electron donor for the regeneration of NADPH.
Mechanism and applications of phosphite dehydrogenase
2005年6月1日 · Phosphite dehydrogenase (PTDH or PtxD) is a unique, aerobic, NAD + dependent enzyme that oxidizes inorganic phosphite (hydrogen phosphonate) to phosphate Eq. (1) [1], [2]. This reaction represents an unusual phosphoryl transfer from a hydride donor to a hydroxide acceptor.
使用工程设计的亚磷酸酯脱氢酶高效再生NADPH ... - X-MOL
2006年9月2日 · 在这里,我们报道了来自斯图氏假单胞菌的高度稳定和活性的突变型亚磷酸酯脱氢酶(12x-A176R PTDH)的工程设计,并评估了其作为酶膜反应器中有效的NADPH再生系统的潜力。 两个实用的重要酶促反应包括木糖还原酶催化的木糖醇合成和醇脱氢酶催化的(R)-苯乙醇合成用作模型系统,并将突变体PTDH直接与市售NADP(+)特异性假单胞菌sp。 101甲酸脱氢酶(mut Pse-FDH),广泛用于NADPH再生。 在两个模型反应中,两种再生酶均显示出相似的酶 …
高活性亚磷酸酯脱氢酶突变体的机理研究及其在NADPH再生中的应 …
有效利用NAD和NADP的突变体亚磷酸酯脱氢酶(PTDH-E175A / A176R)是用于NAD(P)H再生的非常有前途的系统。 在这项工作中,对PTDH-E175A / A176R的动力学机理和实际应用进行了研究,以更好地理解该酶并为将来的优化提供基础。 使用PTDH-E175A / A176R进行的动力学同位素效应研究表明,氢化物转移步骤是(部分)通过NAD和NADP进行速率测定,分别得出(D)V值为2.2和1.7,以及(D)V / K(m亚磷酸酯)值分别为1.9和1.7。 为了更好地理解松弛的辅因子 …
亚磷酸脱氢酶(PTDH)(编号:BLE039-1B)_NADH再生系统_产品 …
来源于工程大肠杆菌表达的亚磷酸脱氢酶(Phosphite Dehydrogenase, PTDH),属于氧化还原酶,参与生物体中亚磷酸的代谢,以 NAD+ 或 NADP+ 为受体的供体,用于催化亚磷酸氧化成磷酸,同时将 NAD (P)+ 还原成 NAD (P)H。 在常见的各种辅酶再生系统中,亚磷酸脱氢酶具有低 Km 值, 基本无逆反应,产物磷酸高浓度下不抑制反应,较宽的 pH 稳定性等优点,在工业生物催化的辅酶再生过程中具有较高的应用价值和广阔的应用前景。 酶促反应: phosphonate + NAD (P)+ …
Darma Henwa
1 天前 · Prosperity Tower Lantai 39, SCBD, District 8, Lot 28, Jl. Jenderal Sudirman Kav. 52 – 53, Kelurahan Senayan, Kecamatan Kebayoran Baru, Jakarta Selatan, 12190
Efficient regeneration of NADPH using an engineered …
2007年1月1日 · Here, we report the engineering of a highly stable and active mutant phosphite dehydrogenase (12x-A176R PTDH) from Pseudomonas stutzeri and evaluation of its potential as an effective NADPH regeneration system in an enzyme membrane reactor.
- 某些结果已被删除