2023年3月26日 · Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合，其中的“RT”是Reverse transcription（逆转录）的意思，所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR，即以mRNA或总RNA为模板，先反转录得到cDNA，再以cDNA为模板，通过荧光定量PCR进行定量检测 …

real-time RT-PCR中间的“RT”是 reverse transcription（逆转录），整个意思就是利用 mRNA 或 总RNA 为模板的实时 逆转录PCR 技术（quantitative Real-time RT-PCR）。 real time RT-PCR指的是 qPCR+RT-PCR的组合，是说将mRNA逆转录为cDNA后再作为模板进行实时荧光PCR分析，因为RT-PCR是可以定性的，但不能进行定量检测的。 所以不难理解 real-time RT-PCR（RT-qPCR） 就是结合了荧光定量技术的反转录PCR：先从 RNA 反转录得到 cDNA（RT），然后 …

RT-qPCR由普通PCR技术发展而来，它是在传统PCR反应体系中加入荧光化学物质（荧光染料或者荧光探针），根据各自不同的发光机制实时检测PCR退火、延伸过程中荧光信号变化来计算PCR每个循环中产物的变化量，目前最常见的方法为 荧光染料法 和 探针法。 一些荧光染料如 SYBR Green Ⅰ，PicoGreen，BEBO等，它们本身不发光，但结合于dsDNA的小沟后会发出荧光。 所以当PCR反应刚开始时机器并不能检测到荧光信号，当反应进行到退火-延伸（二步法） …

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time polymerase chain reaction）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。 通过内参或者外参法对待测样品中的特定 DNA序列 进行定量分析的方法。 它结合了PCR技术和实时荧光检测技术，能够在PCR反应过程中实时监测DNA的扩增情况 [1]，从而实现对靶DNA的定量分析。 实时荧光定量PCR的基本原理是利用DNA聚合酶在PCR过程中合成新DNA链的特性，结合一种 荧光标记 的 …

什么是实时荧光定量pcr (rt-pcr，qpcr)？ 实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）指的是在PCR进行的同时，对其过程进行监测的能力（即实时）。 因此，数据可在PCR扩增过程中，而非PCR结束之后，进行收集。

通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行 标记跟踪，实时在线监控反应过程，通过仪器和相应的软 件分析结果，对待测样品的初始模板进行定量或定性分析。 3. Ct值与起始模板的关系 研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存. 在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。 利用已知起始拷贝 数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对 数，纵坐标代Ct值。 因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从 2标0 准曲线上计算出该样品的起 …

接下来，我们以人的Bcl-2（B淋巴细胞瘤-2基因）基因为例，设计一对可以同时扩增其不同剪切变体的qPCR引物。 首先，通过NCBI查询Bcl-2的基因结构，这里要注意对比基因名称、种属，确保都要一致。 Bcl-2有2个不同的转录本，一共有3个外显子区域，其中第1个和第2个外显子区域是共有的。 我们的目的是将不同的转录本都扩增出来，所以需要找到这些转录本的同源序列。 可以看到，这个基因有多个不同的转录本，第一个转录本的第1、2个外显子区域是所有转录本的同源 …

2024年5月29日 · 实时pcr(rt-pcr)是一种使用荧光染料或探针（实验室通常称为引物）技术对样品中存在的核酸进行定量的技术或实现靶基因/序列的扩增。 rt-pcr足以扩增目标是模板dna (cdna是其中一种) ，也就是说，它可以在pcr仪器（热循环仪器）复制dna。它使我们能够研究目标序列 ...

Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, also called RT-qPCR, is used to detect and quantify RNA. Total RNA or mRNA is first transcribed into complementary DNA (cDNA). The cDNA is then used as the template for the quantitative PCR or real-time PCR reaction (qPCR).

QuantiFast Pathogen +IC Kits provide sensitive real-time PCR or one-step RT-PCR using sequence-specific probes for detection of pathogen DNA and/or RNA including an internal control. The kits can be used on a wide range of real-time cyclers, including cyclers from QIAGEN, Applied Biosystems, Bio-Rad, Roche (except for capillary cyclers), and ...