这是Western blot最常规的应用，如检测患者的标本与正常人的标本、实验条件处理后细胞与未处理的对照细胞之间目的蛋白的表达变化情况，通过灰度分析可以确定目的蛋白表达水平是升高还是降低。 （二）研究蛋白间的相互作用. 这是与免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，CO-IP）技术相结合的一种检测蛋白质之间相互作用的常用方法。 通过CO-IP技术将相互作用的蛋白质复合体分离出来后进行凝胶电泳，然后利用相互作用的蛋白质的特异性抗体进行检测。 适用于对已知 …

Bis-Acr（丙烯酰胺）：为蛋白质电泳提供载体• 丙烯酰胺单体和交联剂N N′-亚甲基双丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合成含有酰胺基侧链的脂肪族长链。 相邻的两个链通过亚甲基桥交联起来就形成三维网状结构的聚丙烯酰胺…

WB实验中，绝大部分蛋白的分子量位于20-100kDa范围，因此在没有特殊要求的情况下使用10%的凝胶，可以基本保证不同分子量蛋白的较好分离。 表1 不同凝胶浓度所适合的分离蛋白的分子量和线性分离范围 表2 不同浓度分离胶配方 表3 浓缩胶配方

2013年9月5日 · 1. 30%储备胶溶液： 丙烯酰胺(Acr) 29.0g 亚甲双丙烯酰胺(Bis) 1.0g 混匀后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室温。 2. 4×分离胶缓冲液(1mol/L Tris-HCl PH 8.8) Tris 18.17g加ddH2O溶解，浓盐酸调PH 8.8，定容至100ml。

蛋白质分离和监测最基本的方法是聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamide ge electrophoresis, PAGE)。 1丙烯酰胺，这东西是蛋白质胶的主要成分，不完全聚合 具有神经毒性， 属于中等毒性。 具体地说，包括了 急性毒性，生殖发育毒性，遗传毒性，致癌性. 2 Tris 中文品名为三羟甲基氨基甲烷 毒性低，可致癌，不要直接接触皮肤。 3 SDS 中文名为十二烷基硫酸钠 是一种 刺激物, 并造成对眼睛的 严重损伤的危险。 可因吸入、咽下或皮肤吸收而 损害健康。 4 过硫酸铵 对皮 …

30% Acr-Bis (29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。 30% Acr-Bis (29:1)常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。

2019年1月2日 · Neal Burnette 于 1981 年所著的 Analytical Biochemistry 中首次被称为 Western Blot。 最开始做印迹的是一个叫 Southern 的科学家，但印迹的对象是 DNA 链，他把这种技术称为 Southern blot，后来出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对 RNA，一个对蛋白质，人们分别把这两种技术的称为 Northern 和 Western，与这两个技术的发明人没有关系了。 由于这一步方法各异，具体步骤请参考试剂盒的说明书即可。 蛋白质的样品制备是 Western …

2024年1月28日 · 有很多同学会有疑问，为什么别人跑出来的条带又清晰又好看，其实western blot的每一步实验都很关键，今天我们就来讲讲最基础的配胶，制胶虽然简单基础但是对最终实验结果的影响却非常大。 一、SDS PAGE 凝胶制备步骤. 1、玻璃板梳子的清洁. 先用自来水浸泡5分钟，洗洁精清洗，注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶，可以用尖锐的东西轻刮，然后用自来水冲洗干净泡沫，再用纯水冲洗即可，37度烘干或者吹风筒吹干，注意别用热风长时间近距离吹，厚 …

详细解释WB 实验中 膜制备 (6% gel) 流程 |Abcam Hello. We're improving abcam.com and we'd welcome your feedback. Take a look Maybe later. Hello. We're improving abcam.com and we'd welcome your feedback. ... 30%Acr/Bis: 1.6ml: 10%SDS: 80ul: 10%APS: 80ul: TEMED: 5ul: 2. 样 …

30%Acr/Bis (29:1)制胶液, 30%即为含30% Acrylamide-Bisacrylamide的水溶液，其中Acrylamide和Bisacrylamide的比例为29:1。 电泳溶液Acryl/Bis (29: 1), 30%常用于配制PAGE胶，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离，是实验室的常用储备液。 保存条件：4℃避光保存。 使用说明：可根据配制PAGE胶，包括SDS-PAGE胶等配方表使用本产品。 不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围。 注：小分子蛋白分离可以选择40%Acr-Bis（37.5:1）；核酸分离可以 …